腰穿术的操作方法是1. 患儿取左侧卧位，背部与检查床垂直，脊柱与床平行。协助患儿屈颈抱膝，尽量使脊柱前屈，利于拉开椎间隙。2. 选择穿刺部位，沿双侧髂嵴最高点做一连线，与脊柱中线相交处为第4腰椎棘突，然后选择第4、5腰椎间隙进针，如失败可以选择第3、4腰椎间隙或第5腰椎与骶骨间隙，婴儿及新生儿以第4、5腰椎间隙为宜。3. 常规消毒铺无菌巾，用2%的利多卡因在穿刺点局部做皮内和皮下麻醉，然后将针头刺人韧带，回吸无血液，边退针边推注。麻醉生效后，操作者用左手固定穿刺部位皮肤，右手持针，针头斜面向上刺入皮下后，针头略向头部倾斜，缓慢进针。刺人靭带时可感受到一定的阻力，当阻力突然减低提腰穿术示进入蛛网膜下腔，抽出针芯，脑脊液自行流出，留取脑脊液标本。测定压力时嘱患儿放松，并缓慢将双下肢伸直。
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